022240 克氏双糖铁培养基

  (Kligler Iron Agar)

  用 途：

  克氏双糖铁琼脂用于鉴别肠道菌发酵葡萄糖和乳糖，及产生硫化氢的生化反应(GB/T4789.28-2003 中4.29，GB/T4789.6-2003)。

  原 理：

  蛋白胨、牛肉膏粉和酵母膏粉提供氮源、维生素、矿物质;乳糖、葡萄糖为可发酵糖类，其产酸时通过酚红指示剂测出，酸性呈黄色，碱性呈红色;硫代硫酸钠可被某些细菌还原为硫化氢，与铁盐生成黑色硫化铁;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。各种革兰氏阳性杆菌也可生长及产生硫化氢。

  培养基配方(每升)：

  蛋白胨 20g

  牛肉膏粉 3g

  酵母膏粉 3g

  乳糖 10g

  葡萄糖 1g

  氯化钠 5g

  柠檬酸铁铵 0.5g

  硫代硫酸钠 0.5g

  琼脂 12g

  酚红 0.025g

  最终pH 7.4±0.2

  使用方法：

  1、称取克氏双糖铁琼脂55g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装试管(装量宜多些)，121℃高压灭菌15min，制成高层斜面，待冷却后，备用。

  2、挑取待检菌的新鲜培养物，穿刺接种混合克氏双糖铁琼脂斜面。接种时先在斜面划线，然后再穿刺底层，反之亦可。(应注意不要在分离平板上菌落密集的部位挑取可疑菌落，而应在菌落稀疏部位挑取单个菌落。)

  3、将试管放入培养箱内36±1℃培养18—24h。

  4、观察结果。观察斜面与底层的反应情况。

  质量控制：

  配成的培养基为红色，下列菌株接种后于36±1℃培养24h结果如下：

  注：“A”为产酸，“K”为产碱。